美伊第六轮谈判前，以色列对伊朗发动了致命一击。从当地时间13日凌晨开始，以军已对伊朗发动5轮空袭，打击了伊朗的防空系统目标、地对地导弹设施，并大规模清除了伊朗高级官员，还打击了伊朗武装部队总参谋部和其境内的核科学家。

以色列国防军发言人称，当天凌晨以军共出动超过200架战机参与对伊朗的首轮空袭。以军表示，此次行动将持续数日，直至消除这一威胁为止，目标是“打击伊朗核基础设施、弹道导弹工厂以及军事能力”。内塔尼亚胡在安全内阁紧急会议上表示，以色列准备防御伊朗比上次更大规模的报复。以军官员称，他们正处于战略机遇期，已经到了不归路，除了立即采取行动，别无选择。

上海外国语大学中东研究所教授丁隆指出，以色列此次空袭伊朗有三个主要目的：一是摧毁伊朗的核能力，二是引发伊朗国内混乱，三是阻止美国和伊朗达成核协议。以色列认为如果美伊达成协议，意味着以色列和美国联合遏制伊朗的阵线将瓦解。以色列认定其在伊朗问题上被孤立，只能单干，军事打击是唯一选项。

以军发布声明表示，“数十架以军战机已完成了第一阶段的空袭行动，其中包括袭击伊朗不同地区的数十个军事目标，其中包括核设施目标。”据央视新闻消息，当地时间13日早间，在对伊朗发动的第一轮打击行动中，以色列袭击了至少10名伊朗核科学家。伊朗伊斯兰共和国广播电视台报道，伊朗伊斯兰革命卫队位于德黑兰的总部遭到以色列的袭击，多名重要人物遇袭身亡或受伤。

袭击发生后，伊朗最高领袖哈梅内伊发声，称以色列本次袭击暴露了其“邪恶本质”，并表示以色列将受到严厉惩罚。伊朗武装部队总参谋部发表声明称，以色列跨越了所有红线，伊朗将对这一罪行进行无止境的报复。伊朗外交部也发表声明，谴责以色列的侵略行为，表示将毫不犹豫地保卫国家。

联合国秘书长安东尼奥·古特雷斯敦促以色列和伊朗“表现出最大限度的克制”。美国国务卿鲁比奥表示，美国没有参与或协助以色列此次对伊朗的袭击。国际原子能机构表示正密切关注局势。澳大利亚外长黄英贤、新西兰总理克里斯托弗·拉克森等多国政府均对局势表示担忧，呼吁各方不要采取进一步加剧紧张局势的行动。

中国外交部发言人林剑表示，中方对此高度关注，反对侵犯伊朗主权安全和领土完整，反对激化矛盾、扩大冲突。地区局势再度骤然升温，不符合任何一方利益。中方呼吁有关各方多做有利于促进地区和平稳定的事，避免紧张事态进一步升级。

复旦大学中东研究中心主任孙德刚分析，接下来，伊朗可能会通过直接攻击以色列本土和采取“代理人”策应打击两种手段进行报复。西北大学以色列研究中心主任王晋表示，未来的局势走向取决于伊朗如何评估这轮袭击所遭受的损失，以及将如何采取措施向以色列进行报复。结合此前伊朗对以色列的两轮军事报复，伊朗这一次的报复规模可能会更大，力度可能更强，中东地区全面战争的风险将进一步增加。