摘要：猪瘟（CSFV）和猪繁殖与呼吸综合征（PRRSV）是危害我国养猪业的两类重要的传染性疾病，为了评估四川部分地区规模化养殖场猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫效果，本研究采用酶联免疫方法（ELISA）对四川成都、广元、攀枝花、内江四个猪场送检的213份猪血清样本进行了CSFV和PRRSV抗体检测。结果表明：有168份血清CSFV免疫抗体阳性，阳性率为78.87%，四个猪场中阳性率最高为89.80%，最低为63.93%；162份PRRSV抗体阳性，阳性率为76.06%，四个猪场中阳性率最高为93.15%，最低为57.38%。按不同猪群统计显示，母猪及公猪群体的猪瘟疫苗免疫效果较好，仔猪群体具有较好的母源抗体，而保育猪猪瘟免疫抗体数据较差，提示仔猪猪瘟的免疫程序及免疫剂量需要进行调整。猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体中母猪免疫抗体效果差异明显，提示部分养殖场母猪的免疫程序及免疫剂量需进行调整。本研究结果可以为四川地区规模化养殖场CSFV与PRRSV防控提供技术支撑。
关键词：猪瘟；猪繁殖与呼吸综合征；抗体；检测；免疫效果
猪瘟（CSFV）和猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是危害我国养猪业的两类重大传染病，常单独或混合感染，给猪场造成严重的经济损失。猪瘟疫苗免疫普遍，目前主要问题在种猪场的垂直传播造成仔猪带毒持续感染等问题。猪繁殖与呼吸综合征主要表现为呼吸道症状和繁殖障碍的传染病，仔猪和繁殖母猪最为易感，其最为主要的流行病学特点是持续感染。猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征主要通过免疫预防控制，但疫病存在新的流行性特点，也存在病毒变异情况[2]，增加了猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征的防控难度。加强疫苗免疫和监测，是防控这两种病的有效手段。
四川是我国养猪大省，四川猪场的猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征的总体免疫效果较好，但丁梦蝶等[3]对2017年四川部分地区猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征的免疫抗体监测结果表明，部分猪场或地区存在免疫失败的现象，影响养猪业的健康发展。因此，针对猪场开展猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征的免疫与抗体监测，不断提高猪场抗体水平，有助于科学防控这两种疫病。
本研究采用IDEXX试剂盒对四川成都、攀枝花、广元、内江等地的4个猪场的猪血清样品进行了CSFV和PRRSV免疫抗体检测与分析，为猪场评估免疫效果和指导改进免疫程序提供依据。
1 材料和方法
1.1 试验场所
四川农业大学成都校区猪病研究中心实验室。
1.2 主要设备和试剂
酶标分析仪、普通离心机、EP管、微量移液器、恒温箱等。猪瘟病毒（CSFV）抗体检测试验盒（IDEXX）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体检测试验盒（IDEXX），由四川农大猪病研究中心提供。
1.3 血清样本收集与处理
2021年四川成都、攀枝花、广元、内江四个地区4个猪场，均进行过CSFV和PRRSV疫苗免疫。每个猪场分别对仔猪、保育猪、母猪三种猪群采样，一个猪场采集了公猪血液样本，成都、攀枝花、广元、内江四个猪场分别采样73、30、61、49份，共计213份猪血液样品，送到四川农业大学猪病研究中心实验室。按不同猪场、不同猪群进行分类编号。未加抗凝剂的血样在室温下倾斜放置1h，再放入冰箱中4℃保存24h后取出，经过5,000r/min离心5min后，取黄色透明的上清液即为血清；若采血时在血里加了抗凝剂，直接3,000r/min离心5min取上清。用移液枪将符合要求的血清收集于EP管内后置于-20℃条件下保存备用。
1.4 抗体检测
参照IDEXX试剂盒说明书，对送检来的213份血清用间接ELISA法分别进行猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征的免疫抗体检测。CSFV抗体结果判定所需数据有样品孔吸光度值ODTEST、阳性对照的平均值ODPOS、阴性对照平均值ODNBC。阻断率=（ODNBC-ODTEST）/ODNBC。猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测结果判定所需数据有阴性对照平均值NCx、阳性对照平均值PCx、样本/阳性对照比率（S/P）。S/P=（样品孔吸光度值-NCx）/（PCx-NCx）。CSFV抗体成立前提：阴性对照平均OD450应大于0.5，阳性对照的阻断率应大于50%。PRRSV抗体实验成立前提：阳性对照的平均值（PCx）和阴性对照的平均值（NCx）差值大于或等于0.150。抗体判定标准：CSFV抗体的有无（阳性/阴性）：若被检样本的阻断率大于或等于40%，则为CSFV抗体阳性，反之，则为抗体阴性；PRRSV抗体的有无（阳性/阴性）：若S/P值大于或等于0.4，样品应判为PRRSV阳性，反之则为抗体阴性。
1.5 抗体结果分析
统计汇总猪场抗体检测结果，分析猪场抗体免疫效果。
2 结果
2.1 猪瘟的抗体结果
1）四个猪场CSFV抗体的总体检测结果 2021年5—11月四川省成都、广元、攀枝花、内江4个地区四个猪场共送检213份猪血清，用IDEXX试剂盒检测免疫抗体，共168份猪瘟抗体阳性血清，平均阳性率为78.87%。四个猪场中猪瘟抗体阳性率最高为89.80%，最低为63.93%（结果见表1）。
2）四个猪场不同猪群CSFV抗体结果 表2的统计结果显示：在不同猪场的不同猪群阶段中，仔猪的猪瘟免疫抗体阳性率最高为100.00%，最低为60.00%；母猪的猪瘟免疫抗体阳性率最高为100.00%，最低为80.00%；保育猪的猪瘟免疫抗体阳性率最高为84.31%，最低为40.00%（结果见表2）。不同猪场的猪瘟免疫抗体整体情况有所不同。成都猪场猪瘟的总体免疫抗体阳性率相对较高，而广元猪场猪瘟的总体免疫抗体阳性率相对偏低。
2.2 猪繁殖与呼吸综合征抗体检测结果
1）四个猪场PRRSV抗体总体结果 2021年5—11月四川成都、广元、攀枝花、内江地区四个猪场共送检213份猪血清做免疫抗体检测，共162份猪PRRSV免疫抗体阳性血清，阳性率为76.06%，四个猪场中猪PRRSV免疫阳性率最高为93.15%，最低为57.38%，具体结果见表3。
2）四个猪场PRRSV不同猪群抗体结果 表4的结果显示：在不同猪场的不同猪群阶段中，仔猪的PRRSV免疫抗体阳性率最高为100.00%，最低为50.00%；母猪的PRRSV免疫抗体阳性率最高为100.00%，最低为61.54%；保育猪的PRRSV免疫抗体阳性率最高为100.00%，最低为87.50%。不同猪场的PRRSV免疫抗体整体情况有所不同。成都猪场除了母猪外，仔猪和保育猪的PRRSV免疫抗体总体阳性率高；而攀枝花、广元、内江猪场的仔猪PRRSV免疫抗体阳性率较低，其余猪群的PRRSV免疫抗体阳性率总体相对较高。
3 讨论
猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征是目前猪场普遍感染和引起持续损失、危害现代养猪业两种最主要的疾病，是规模化养猪场需要进行基础性免疫的两类重要疫病，因此这两类疾病免疫程序的科学制定非常重要。由于两类疾病疫苗的生产厂家众多，同时猪繁殖与呼吸综合征疫苗存在毒株性的差异，从而导致规模化猪场的免疫程序及免疫效果存在很大差异，因此针对不同的猪场，开展免疫效果评估，根据评估结果及时改进免疫方案，为达到更高效地防控疫病提供技术支撑是非常有必要的。
本研究检测了四川部分地区4个规模化养猪场的免疫抗体检测，从表1和表3可看出四个猪场猪瘟和猪PRRSV的免疫抗体平均阳性率分别为78.87%和76.06%。表2和表4可看出猪瘟母猪及公猪群体免疫效果较好，仔猪母源抗体整体效果比较理想，而保育猪免疫效果较差，存在感染风险。猪PRRSV母猪群体免疫效果差异较大，仔猪群体免疫抗体普遍不高，提示部分养殖场的免疫程序及免疫剂量需要进一步的优化。
从表1和表3可看出攀枝花和广元地区的两个猪场猪瘟和猪PRRSV的免疫抗体阳性率整体较低，其中猪瘟抗体阳性率分别为66.67%和63.93%，猪PRRSV抗体阳性率分别为70.00%和57.38%。初步分析造成的原因：①在采样时就发现这两个猪场的环境卫生状况不良；②饲养管理不规范，免疫程序执行不严格。因此对于这两个猪群应加强免疫抗体监测，及时进行补免工作。
分阶段统计显示，从表2可以看出仔猪和母猪的猪瘟免疫效果较好，而保育猪的免疫效果相对较差，从表4可以看出保育猪和母猪的猪繁殖与呼吸综合征免疫效果好，而仔猪的免疫效果较差，表明不同的猪群对于疫苗的免疫反应存在差异。跟没有获得母源抗体的仔猪相比，获得了母源抗体的仔猪受疾病感染的程度要轻很多。母源抗体的持续时间对于仔猪的首次免疫有很大影响。保育猪极易发生应激，出现免疫效果的差异变化可能与动物机体的免疫系统不完善、饲养管理条件以及母源抗体干扰有关。
因此，在规模化养猪场内开展持续的抗体监测，根据免疫抗体消长规律制定科学的针对性强的免疫计划是保证猪场健康养殖的关键。免疫效果不理想的猪群，应分析免疫失败原因并及时进行补免。同时，猪场要重视环境卫生，做好消毒工作，搞好饲养管理，增强机体抗病力，提高免疫效果。还要注意消除其它疾病对疫苗免疫的影响。有条件的猪场尽量开展种猪的猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征净化。
参考文献：略
作者：罗成刚/ 成都市畜禽遗传资源保护中心
来源：《中国动物保健》2022年11月刊
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