小质粒,大能量!质粒构建及制备,泓迅生物带你一文秒懂。
质粒是连接、传递和表达外源基因的重要桥梁。它将外源基因安全、有效地传递到目标细胞中,为基因工程、基因治疗以及合成生物学等领域打开了新的大门。
绝大多数的质粒是DNA型的,少部分为RNA型。天然DNA质粒大都具有共价、封闭、环状的分子结构,具有分子量大、拷贝数低、单一酶切位点少等特点。
质粒载体工程化改造
天然质粒通过一系列的工程化改造,可以转变成基因工程中最常用的载体,称为质粒载体。这些改造通常包括以下几个方面:
根据功能和用途不同,质粒载体可分为多种类型,每种类型的质粒载体都有其独特的优势。
常规基因表达载体、重组蛋白表达载体、非编码RNA表达载体及抗体蛋白表达载体比较如下:
编辑载体的设计和构建需要高度的专业知识和技能,以确保编辑的精确性和效率。根据编辑对象不同,主要分为CRISPR Cas9敲除载体和CRISPR Cas13敲除载体,比较如下表:
重组质粒构建
重组质粒的构建是分子生物学和基因工程领域中的一项重要技术,它允许研究人员将特定的基因或DNA片段插入到质粒载体中,从而创建出具有特定功能的重组质粒。这种技术对于基因克隆、基因表达、基因编辑以及转基因生物的研究和开发都具有重要意义。
整个流程中需要掌握一些基本的技巧,如PCR引物的设计、酶切位点的选择、连接反应的条件优化等。此外,还需要注意实验操作的规范性和准确性,以确保构建的重组质粒具有预期的功能和效果。
质粒载体制备
质粒的制备的技术关键在于确保高纯度和高稳定性,整个工艺流程都需要精细化的操作。
泓迅生物—载体全平台——设计/改造/构建
泓迅生物为客户提供从质粒载体设计、改造、构建及制备一站式解决方案,帮助客户轻松解决载体构建相关难题,满足不同方向的应用需求。
质粒载体制备
我们提供完备的质粒DNA制备服务,确保质粒高质量,无动物成分,低内毒素含量,满足转染、抗体制备、疫苗和基因治疗等多样化应用。
Reference
Marie, Corinne, and Daniel Scherman. "Antibiotic-Free Gene Vectors: A 25-Year Journey to Clinical Trials." Genes 15.3 (2024): 261.